輪狀病毒是借由糞口途徑傳染的。它會感染與小腸連結的腸黏膜細胞（enterocyte）并且產生腸毒素（enterotoxin），腸毒素會引起腸胃炎，導致嚴重的腹瀉，有時候甚至會因為脫水而導致死亡。雖然輪狀病毒于1973年就被由澳洲的露絲·畢夏普（Ruth Bishop）所發現，而且造成嬰兒與幼兒總計超過50%以上因為嚴重腹瀉而住院治療的案例，但是在公共衛生社群中它仍然沒有被廣泛地重視，特別是在發展中國家更是如此。除了對人類健康的影響之外，輪狀病毒也會感染動物，是家畜的病原體之一。
用棉簽收集剛排泄的糞便樣品，或直接從直腸取樣。如果是對無腹瀉癥狀動物進行輪狀病毒的篩查，請采用直腸取樣。不建議采集干燥的糞便樣品，因為采集干燥糞便常常會因為樣品采集過量而出現假陽性。
立即將棉簽插入裝有樣品緩沖液的收集管，將棉簽在管壁上反復用力旋轉至少10次，并混勻溶液，使標本盡可能溶解在溶液中。在試管壁上擠壓棉簽，使液體盡可能被擠出，丟棄棉簽。
如果糞便顆粒較大，可以靜置1-2分鐘，使大顆粒沉淀。
從密封袋中取出檢測卡。將檢測卡放置在平整表面，用吸管從收集管內吸取上層清亮液體，緩慢、逐滴的準確滴加5滴到有“S”標記的加樣孔內。
在室溫下放置10-15分鐘判斷結果，超過15分鐘的結果無效
輪狀病毒抗原快速檢測卡注意事項：
鋁箔包裝袋破損的產品不能使用。檢測卡取出后1小時內必須使用。
請使用隨附的樣品緩沖液，不同產品之間的緩沖液請勿混用。
取樣好的樣本應立即進行檢測，避免長時間存放。
樣本的采集直接影響到檢測的準確性，所以確保正確、充分的采集樣本。
過量的采集糞便樣本會影響液體的正常涌動，并導致錯誤結果（黑色帶出現），而過少的樣本又有可能出現假陰性結果，所以請根據圖示控制采樣量。
把樣品加入到檢測卡加樣孔時應該避免產生泡沫。
已過有效期的產品不能使用。
必須依據各地相關規定對用過的檢測卡及樣本作為污染物，妥善處理。
